微生物限度检测仪CYW-600S多联细菌过滤器

微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。

　　一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。

　　1. 微生物计量法

　　1.1 体积测量法

　　又称测菌丝浓度法，通过测定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取量的待测培养液（如10 mL）放在有刻度的离心管中，设定的离心时间（如5 min）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有偏差。

　　称干重法

　　可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将体积待测培养液倒入离心管中，设定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

　　1.3 比浊法

　　微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600 nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.coli的生长及诱导时间。

　　1.4 菌丝长度测量法

　　对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。

　　2. 微生物计数法

　　2.1 血球计数板法

　　血球计数板是一种有结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中间有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中间0.1 mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察，统计大格内微生物的数量，即可算出1 mL菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。

　　2.2 染色计数法

　　为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在 下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在 下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。

　　2.3 比例计数法

　　将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按比例均匀混合，在 视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。

微生物限度检测仪CYW-600S多联细菌过滤器

1 食物微生物检验工作的内容 

　　1.1 食物微生物检测概述 

　　食品微生物检测是运用微生物学的理论与方法，检验食品中微生物的种类、数量、性质及其对人的健康的影响，以判别食品是否符合质量标准的检测方法。食品微生物检验方法是食品质量管理必不可少的重要组成部分，它是贯彻“预防为主”的方针，可以有效地防止或者减少食物人畜共患病的发生，保障人们的身体健康。食品微生物检测是衡量食品卫生质量的重要指标之一，也是判定被检食品是否有食用价值的科学依据之一。通过食品微生物检测，可以判断食品加工环境及食品卫生情况，并且能够对食品被细菌污染的程度作出正确的评价，为各项卫生管理工作提供科学依据。 

　　1.2 食物微生物检测的指标 

　　目前，我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌落总数、大肠菌群和致病菌三项。菌落总数主要是指食品检样在经过样品处理、培养基及其pH值、培养温度与时间、计数方法等条件的严格控制下的培养后，单位重量、容积或表面积上，所生成的细菌菌落总数;大肠杆菌来自人或温血动物肠道，这些细菌是寄居于人及温血动物肠道内的常居菌，它会随着大便排出体外。食品中如果大肠菌群数越多，说明食品受粪便污染的程度越大。故以大肠菌群作为粪便污染食品的卫生指标来评价食品的质量，具有广泛的意义;致病菌是能够引起人们发病的细菌。大肠菌群检验呈阳性，并怀疑食品可能受到致病菌污染时可进行致病菌检验。不同的食品和不同的场合，应选择的参考菌群进行检验。 

　　2 确保食品微生物检测工作的质量的策略 

　　2.1 提高检测人员的专业素质 

　　食物微生物检测工作具有极强的专业性，需要对检验工作的各个方面进行严格的把握和科学的控制。为确保食品微生物检测工作的质量需要提高微生物检测人员的专业素质。检测人员具备严谨的工作态度和较强的责任感，还要注重不断的提升自己。检测人员要接受定期的专业培训，丰富自己的专业知识和专业技术，及时的发现和处理食物微生物检测工作中的问题，注重提高自身工作质量和工作效率。 

　　2.2 保证食品微生物检测的设施和环境的质量 

　　进行食品微生物检测工作的实验室环境的优劣会对检测结果造成重大的影响，实验室环境要保持清洁卫生，这样可以减少交叉污染，同时还要对它的湿度、温度和光照等进行合理的控制，保证食物微生物检测工作环境的质量。食品微生物检测的设施要齐全，不仅要保证食品微生物检测工作的顺利进行，还要对检测人员配备的保护设施，使他们免受伤害，也有效的避免环境污染，提高食品微生物检测工作的质量。 

　　2.3 保证食品微生物检测仪器设备的质量 

　　食品微生物检测仪器设备需要有专人保管并要对它们的使用和维护进行及时的记录，定期对这些仪器和设备的性能进行检查，保证其能准确的为食品微生物检测工作服务。还要注意对食品微生物检测仪器设备进行杀菌处理和保存，确保检测结果的准确性。 

　　2.4 对食品微生物检测过程进行质量保证 

　　在对食物进行微生物检测时，要严格按照科学的操作规程进行，规范检测过程。从食物微生物的取样、培养一直到得到检验结果，中间的各个环节和相应的操作流程和规范都需要检测人员的严格履行。在食品微生物检测结束后，及时的清理垃圾，将实验室消毒清洁。对食品微生物检测过程进行质量保证可以确保食物微生物检测工作的质量，进而保证食物安全和人们的生命健康。