产品名称：EasylD单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定试剂盒

英文名称：EasylD Biochemical Identification Kit for Listeria monocytogenes

包装规格：10测试/盒

产品编号：HKI008

产品简介：本试剂盒基于一步加样技术，用于单核细胞增生李斯特氏菌的生化鉴定（GB4789.30)。

产品组分：
      主要组分：EasylD单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定条10条、发酵添加剂10瓶、半固体琼脂10瓶、3%过氧化青溶液10瓶。
      其它组分：悬浮培养基10瓶、麦氏比浊管1瓶、甲基红试剂1瓶、VP试剂甲液1瓶、VP试剂乙液1瓶、记录表1册、产品说明书1份。

储存条件与保质期：2〜8°C保存，有效期见试剂盒外标签。

使用指南：
      1，取鉴定条及悬浮培养基，使用前平衡至室温；开启同等数量的发酵添加剂、3%过氧化青氢溶液和半固体琼脂；
      2，从TSA-YE平板上直接挑取可疑单菌落接种于悬浮培养基中，制成1.0麦氏浊度的均一菌悬液；挑取同一可疑单菌落穿刺接种于半固体琼脂和血平板中；按表3备注方法开展过氧化氢酶试验并记录结果；
      3，撕开铝箔袋，取出鉴定条及底座，观察是否异常（如破损请勿使用），并在合适位置做好标记；
      4，从底座上取下鉴定条，并从鉴定条右侧向左掀开贴膜，用微量移液器小心注入2mL菌悬液于分液槽中（避免使菌液提前流入反应孔），贴回贴膜，并依次抬起左右两侧数次，使菌液液面达同一度，然后水平托起分液槽端，确保菌液流入各反应孔中，贴紧薄膜并放回底座。再次从右侧掀开贴膜，向第3、4、5、6号孔准确添加30μL发酵添加剂，贴紧薄膜；

      5，将已接种的半固体琼脂置于25〜30°C下培养，血平板和鉴定条置于36°C±1°C培养；培养完毕，按国标要求读取溶血试验结果，按表3并对照比色卡读取第1〜6孔颜色和半固体琼脂并生长情况，记录结果；掀开贴膜，向第7号孔小心滴加1滴甲基红试剂，立即观察并记录结果;向第8号孔依次逐滴加入3滴VP试剂甲液和2滴VP试剂乙液，不贴紧贴膜，暴露空气10〜30min后，观察并记录结果；旋紧配套试剂瓶盖，并置于2〜8°C保存；

      6，综合菌落形态和GB4789.30单核细胞增生李斯特氏菌生化试验反应结果(见表2)进行判读。

注意事项：
      1，需要使用者自备的用品有：血平板、微量移液器及无菌吸头、生化培养箱等；
      2，所含悬浮培养基及发酵添加剂为本试剂盒专用，不可替换或用于其他试验；第3、4、5、6孔可使用同一瓶发酵添加剂；
      3，反应名称加上划线表示接种后培养前需添加配套试剂，反应名称加下划线表示培养结束后添加配套试剂；
      4，向分液槽中加入菌液后，尽量分散均匀；极个别情况有反应孔分液量接近于100ML，但不影响反应结果；
      5，为避免污染，务必在超净工作台或生物安全柜中进行接种和添加配套试剂，培养前务必贴紧贴膜；未用完的配套试剂应旋紧瓶盖并置于2〜8°C保存；
      6，如果鉴定条已过期，或铝箔袋破损，请勿使用；
      7，本说明书需重复使用，请妥善保管。

废物处理：带菌的鉴定条、吸头和悬浮培养基等试验材料应置12TC下湿热灭菌30分钟之后丢弃。

执行标准：Q/HK0714 微生物微量生化鉴定试剂盒

参考文献：GB4789.30 食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验