产品简介

Cell Meter™检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的工具。多种参数可用于监测细胞活力。Cell Meter 比色法MTT细胞增殖检测试剂盒采用 MTT（3-（4,5 - 二甲基噻唑 - 2 - 基）-2,5 - 二苯基四氮唑溴化物）来定量活细胞数量。水溶性的 MTT 在具有代谢活性的细胞中会生成水不溶性的紫色甲臜。甲臜的生成量与活细胞数量直接成正比，其吸光度增加值可在 560nm 左右进行测定。

与其他商用 MTT 检测试剂盒不同，那些试剂盒需要繁琐的溶解步骤来溶解水不溶性的甲臜产物，而 Cell Meter 比色法MTT细胞增殖检测试剂盒采用简单的 “混合后读取” 模式，操作时间短。我们的专有配方省去了耗时的溶解步骤，是细胞增殖和细胞毒性检测中用于确定活细胞数量的最稳定可靠的 MTT 检测方法，其检测灵敏度是传统 MTT 检测方法的 10 倍。

适用仪器

吸光度酶标仪

吸光度：                                           562 nm

推荐使用的培养板：                          透明底部培养板

实验方案

样品分析方案

概述

在96孔板中制备细胞（100 µL /孔）

添加MTT工作溶液（140 µL /孔）

在37°C下孵育2-4小时

读取560 nm处的吸光度

注：使用前，请在室温下解冻所有试剂盒组分。

工作溶液制备：

将 4 mL MTT 试剂 A（组分 A）与 10 mL MTT 试剂 B（组分 B）混合（MTT 试剂 A:B 的体积比为 2:5），充分混匀。

注意：14 mL MTT 工作液足够 96 孔板的 100 次检测使用。实验前需新鲜配制足量的 MTT 工作液，并立即使用。

实验方案示例

1.在透明底的组织培养孔板中，培养1000至40,000个细胞/孔。

2.将测试化合物添加到细胞中，在37°C，5％CO₂培养箱中孵育所需的时间（例如24、48或96小时）。

3.对于空白孔（不含细胞的培养基），添加相同量的测试化合物。96孔板，建议的总体积为100 µL；384孔板，建议的总体积为25 µL。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定增殖或诱导细胞毒性的细胞密度。对于增殖测定，使用较少的细胞；对于细胞毒性测定，请使用更多的细胞作为开始。

4.向每个孔中加入140 µL /孔（96孔板）或35 µL /孔（384孔板）。

5.在37°C下孵育平板2-4小时，避光。

注意：根据不同的细胞类型和使用的细胞浓度，孵育时间可能从2小时到过夜。优化每个实验的孵育时间。

6.使用吸光度酶标仪在 OD = 562 nm处检测吸光度。

百萤生物为AAT Bioquest授权的中国区域代理商

注：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床及其他非科研用途！