Buccutite AP(碱性磷酸酶)抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化*优势
偶联:采用优化的偶联方法,确保染料和抗体的 结合,减少未标记抗体和过度标记的情况
Buccutite AP(碱性磷酸酶)抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化*适用范围
主要用于标记抗体
Buccutite AP(碱性磷酸酶)抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化*介绍
蛋白质偶联通常采用双功能交联剂(如SMCC),其两端具有不同反应活性以实现两种蛋白质的连接:交联剂一端通过NHS酯与赖氨酸氨基及N末端(-NH2)反应,另一端则通过马来酰亚胺与半胱氨酸巯基(-SH)结合。然而SMCC修饰的蛋白质极不稳定且易发生自发交联,这是因为蛋白质分子含有多个氨基和巯基,会导致严重的交叉连接现象。此外,准确量化蛋白质上的马来酰亚胺基团数量也相当困难且繁琐。Buccutite™碱性磷酸酶(ALP)抗体偶联试剂盒采用预活化ALP设计,可快速制备ALP偶联物。该试剂盒针对25μg蛋白标记进行了优化,其中Buccutite™ FOL活化的ALP能在温和的中性条件下与Buccutite™ MTA修饰的抗体 反应,且无需任何催化剂。相比常用的SMCC等技术,Buccutite™生物偶联系统具有更优异的稳定性和易用性,可实现生物分子的快速定量偶联,并获得更高的偶联效率和产物得率。
图示
图1.使用Buccutite AP(碱性磷酸酶)抗体偶联试剂盒制备的ALP-山羊-抗小鼠IgG偶联物检测了小鼠IgG剂量曲线。将3倍系列稀释的小鼠IgG包被在96孔板上,然后按照标准ELISA方法,向每个孔中加入100uL GAM IgG-ALP偶联物(1ug / ml)。在孵育30分钟后,将pNPP底物溶液用于检测固定的小鼠IgG,并在400 nm处读数。
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