仑昌硕生物              山羊血清淀粉样蛋白A（SAA）elisa试剂盒

可同时中国又是人口大国,这就导致了中国人均占有的畜产品数量还依然很少.然而伴随着人们生活水平的逐渐提高,对畜产品尤其是优质的肉类产品的需求越来越高,这就要求研究者们进一步研究出高产量,高品质的畜产品.肌生成抑制素(Myostatin,MSTN),又称GDF-8,是TGF-β超家族的成员之一,是骨骼肌生长的负调控因子,因其与"双肌性状"关系密切而被广泛关注,该基因的缺失或突变能够引起所编码的蛋白质失活,进而消除其对骨骼肌生长的抑制作用,导致其不能调节肌纤维的降解活动造成肌肉的增生和肥大.由此看来,Myostatin基因与家畜的肉质和胴体性状密切相关.本实验主要研究肌生成抑制素Myostatin基因的融合表达质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响. 本实验首先利用巢式PCR的方法扩增出肌生成抑制素Myostatin基因的编码区,并将该片段连入到乙肝表面抗原HBsAg基因的3'末端,用以增加其免疫原性.而后将其连接到真核表达载体pEF1α-IRES-DsRed-Express2上,成功得到肌生成抑制素与乙肝表面抗原融合表达质粒pEF1α-DsRed-S-MSTN.将该融合质粒转染到牛胎儿成肌细胞中,利用荧光定量PCR技术以及western blot技术检测得知,该真核表达载体能够在牛胎儿成肌细胞中表达.而后,又以3周龄的昆明小鼠为实验对象,用基因免疫的方法检验该融合质粒对小鼠肌肉增殖能力的影响.实验结果表明,用ELISA检测免疫后小鼠血清内生长激素和甘油三酯水平可知,在9周龄时实验组小鼠生长激素高于对照组,且其后又继续有升高趋势.以期进一步可以为高肌肉产量肉牛的培育做出一定的贡献,但是更复杂具体的调控作用还需要进一步的实验研究.

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心血管疾病作为当今世界上患病率和死亡率高的疾病,长期以来受到研究人员的广泛关注.而其中高血压是心血管疾病重要的危险因素之一.许多临床试验显示,糖尿病患者较正常人群具有较高心血管疾病患病率.同时分子生物学研究也证实,Ⅱ型糖尿病和心血管疾病之间存在着密切的联系.抵抗素Resistin作为在胰岛素抵抗发生过程中的重要脂肪因子,被发现在高血压以及其他一些心血管疾病患者血清内具有较高的水平,成为研究糖尿病和心血管疾病之间相互关系的重要因子之一.近些年越来越多的研究表明,Resistin同炎症状态下的动脉粥样硬化,胰岛素抵抗状态下胰岛素调节血管舒张能力受损以及内皮细胞功能紊乱等等都有着密切的关系.但是关于Resistin同高血压之间的关系以及相关的分子机理的直接研究并不是很多.本实验利用小鼠无创血压仪对鼠尾血压进行测量证实Resistin连续处理6天可以引起小鼠体内高血压以及胰岛素抵抗.随后通过TLR4敲除模式小鼠,以及血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂培哚普利进行小鼠灌胃,利用RT-PCR,ELISA,ChIP等实验技术对Resistin诱导小鼠高血压的分子机理进行探索.同时结合正常人群,糖尿病,高血压以及糖尿病兼高血压患者的血清检验进一步探讨Resistin同糖尿病,高血压之间的关系.

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1. 包被抗原：用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃温育1小时后，4℃冰箱放置16～18小时。

 2. 洗涤：倒尽板孔中液体，加满洗涤液，静放三分钟，反复三次，将反应板颠倒在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽。

3. 加封闭液200微升，37℃放置一小时。

4. 洗涤同2。

5. 加被检血清：用稀释液将被检血清作几种稀释,，每孔200微升。同时作稀释液对照。37℃放置2小时。

6. 洗涤同2。

7. 加辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小时。

8. 洗涤同2。

9. 加底物：邻*二胺溶液加200ml，室温暗处10--15分钟。

10. 加终止液：每孔50微升。

11. 观察结果：用酶联免疫检测仪记录450nm读数。

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