仑昌硕生物   小鼠地*辛（DIG）elisa试剂盒

     目的 本文比较了D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠与自然衰老小鼠T细胞功能的变化,研究了CD137分子及CD28分子这两种共刺激分子对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠及自然衰老小鼠T细胞活化增殖,IL-2分泌,细胞存活,bcl-2分子表达及端粒酶活化的作用,以探讨衰老T细胞功能变化的主要特点及其功能调控的分子机制. 方法 通过给BALB/c雄性小鼠背部皮 射D-半乳糖(D-gal)建立亚急性衰老小鼠模型.分离D-半乳糖致亚急性衰老模型组(以下简称衰老模型组),自然衰老组,对照组和青龄组小鼠的T细胞,分别用conA+IgG,conA+CD137单抗,conA+CD28单抗体外活化,应用ELISA测定各组细胞培养上清IL-2浓度,以MTT改良法(CCK-8法)测定各组细胞的增殖状况,流式细胞术测定各组细胞凋亡率,流式细胞术及半定量RT-PCR测定衰老模型组及自然衰老组T细胞bcl-2分子的表达;并应用TRAP ELISA法分析各组T细胞端粒酶的活性. 结果 (1) 自然衰老组与衰老模型组T细胞活化后,细胞增殖能力,培养上清IL-2浓度及细胞存活率均无显著性差异,并且这些指标均均显著低于青龄组和对照组T细胞;(2) 联合应用conA+CD137单抗或conA+CD28单抗均可显著促进自然衰老组及衰老模型组T细胞的活化增殖,提高IL-2的分泌水平,降低细胞凋亡率;但发现CD137单抗对两组衰老T细胞的调节作用比CD28单抗的作用弱;自然衰老组及衰老模型组T细胞的活化增殖,培养上清中IL-2的浓度以及细胞存活率均显著低于相同活化条件下的对照组及青龄组;(3) 发现应用conA+CD137单抗或conA+CD28单抗均能促进自然衰老组及衰老模型组T细胞活化后bcl-2分子及bcl-2 mRNA的表达,其中CD28单抗的作用强于

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       目的研究乳酸杆菌对老龄小鼠外周血T细胞膜型CD28(mCD28)和血清中T细胞可溶性CD28(sCD28)分子表达的影响.方法选取老龄小鼠雌雄各半,分为乳酸杆菌试验组和生理盐水对照组,采用间接免疫荧光及流式细胞仪分析老龄小鼠T细胞mCD28的表达水平,ELISA检测血清中sCD28的含量.结果乳酸杆菌试验组外周血T细胞mCD28的表达水平高于生理盐水对照组(P0.05);而乳酸杆菌试验组血清中sCD28的含量低于生理盐水对照组(P0.01).结论乳酸杆菌可以通过上调外周血T细胞mCD28的表达和降低血清中sCD28的含量而达到免疫调节的作用.目的:研究联合应用CD3/CD28单 抗体对小鼠T淋巴瘤细 胞EL4活化的影响.方法:ELISA方法检测不同浓度CD3/CD28抗体在不同时间点体外刺激EL4细胞后培养上清中IL-2的分泌;CCK-8方法 检测EL4细胞增殖能力;流式细胞术检测EL4细胞周期;RT-PCR检测IL-2,NF-κB和NF-AT转录因子的转录情况

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         目的探讨表达主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类分子的甲状腺细胞如何发挥抗原递呈功能.方法分离表达MHCⅡ类分子的转基因鼠和对照小鼠的甲状腺细胞,免疫磁珠方法分离其自身T细胞,在体外共同培养,并加入抗CD28抗体.免疫荧光染色,流式细胞分析检测T细胞的增殖和活化.ELISA方法检测培养上清的细胞因子浓度.结果单纯表达MHCⅡ类分子的转基因小鼠甲状腺细胞不能刺激自身T细胞的增殖和活化,然而当加入抗CD28抗体后,表达MHCⅡ类分子的甲状腺细胞能刺激自身T细胞的增殖,活化及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)的分泌,而T细胞对野生型小鼠的甲状腺细胞无反应.结论加入协同刺激信号后,表达MHCⅡ类分子的甲状腺细胞也可刺激T细胞增殖活化及分泌细胞因子,具有递呈抗原的能力.

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