大肠埃希氏菌O157：H7/NM生化鉴定盒(GB/T 4789.36-2008, 13种×10次)

  一)整套试剂及用品

  鉴定生化反应的13种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。

  二)西林瓶的使用方法

  开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。

  三)大肠埃希氏菌O157：H7生化鉴定盒的详细使用方法

    大肠杆菌O157：H7为革兰氏阴性杆菌，需氧或兼性，有周鞭毛，并有菌毛，不产生芽孢的杆菌。发酵乳糖，不发酵或迟缓发酵山梨醇；氧化酶阴性；MUG阴性。

    从分离培养平板上挑取可疑菌苔接种于营养琼脂平板上分纯，于35－37℃培养18-24h，挑取菌落置于已配备的无菌生理盐水中，与0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（约0.06mL）菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的 西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如图2左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如图2右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如图2），或放置于合适的瓶架中，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。

    注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。

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备注：本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。

  四)出血性大肠杆菌O157：H7的生化鉴定程序(见下图)和生化鉴定特征(见表2)

    出血性大肠杆菌O157：H7生化鉴定程序图：

    在营养琼脂平板上挑取分纯的菌落，用 O157：H7标准血清或 O157乳胶凝集试剂测试，对于H7因子血清不凝集者，应穿刺 接种半固体琼脂，检查动力，经连续传代3次，动力试验阴性，H7因子血清凝集阴性者，确定为无动力株。