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级别 : |
超纯、高纯 |
含量 : |
95% |
产品规格 : |
1 Plate |
品牌 : |
AAT Bioquest |
用途范围 : |
AAT Bioquest生产的荧光染料 |
特色服务 : |
免费技术咨询 顺丰包邮 |
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *温和发光*
产品订购:QQ:1485814040
简要概述
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒,(ATP)在细胞能量学,代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速,简单和均匀的发光检测,用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。 该测定的高灵敏度允许在许多生物系统,环境样品和食物中检测ATP。 这种PhosphoWorks ATP检测试剂盒具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光,不需要混合或分离,并配制成具有 小的手动操作时间。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。
产品说明书
操作步骤
简要概述
1.用测试化合物(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)制备细胞(样品)
2.加入等体积的ATP工作溶液(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度
溶液制备
1.将整瓶10 mL反应缓冲液(组分C)转移到ATP(组分B)中并充分混合。
2.将20μLATP监测酶(组分A)加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。 注意:避免来自外源生物来源的潜在污染。
样品试验方案
1运行ATP测定:
1.1用测试化合物处理细胞(或样品),在96孔板中加入10μL10X化合物,或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相应量的化合物缓冲液。
1.2将细胞板在37℃,5%CO 2培养箱中孵育所需的一段时间,例如24,48或96小时。
1.3向每个孔中加入100μL(96孔板)或25μL(384孔板)的ATP工作溶液。
1.4在室温下孵育10-20分钟。
1.5用标准发光计监测发光强度。
2.生成标准ATP校准曲线:
如果需要计算样品中ATP的量,则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。
2.1通过包含不含ATP的样品(作为对照)用于测量背景发光,在含有0.1%BSA的PBS缓冲液中制备一系列ATP稀释液。注意:通常ATP浓度从1 nM到10μM是合适的。
2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中(对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL)。
2.3加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的ATP工作溶液。
2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。
2.5用标准光度计监测发光强度。
2.6生成ATP标准曲线。
数据分析
从空白标准孔获得的读数(RLU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。 我们建议使用在线线性回归计算器,该计算器可在以下位置找到:
图1.使用PhosphoWorks发光ATP检测试剂盒测量ATP剂量反应。 以1秒间隔监测10μM至0.1nM的ATP浓度长达5小时。
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