Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基染色试剂盒*红色荧光*

简要概述

高尔基体是大多数真核细胞胞质内囊泡和折叠膜的复合体，参与分泌和细胞内运输。它修饰内质网（ER）中内置的蛋白质和脂质，并准备将其运输到细胞外。它还在脂质在整个细胞中的运输和溶酶体的形成中起着重要作用。Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种简便，快速的方法，可以在活细胞中以红色荧光染色高尔基体。高尔基体通过形成相应的荧光代谢产物而被染色。Cell Navigator™TMR神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种优化的测定方法，可用于通过荧光显微镜检查高尔基体的形态。

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产品说明书

样品分析方案

概述

根据需要处理细胞

加入GGR169-神经酰胺工作溶液并在室温或37°C下孵育15至30分钟

添加染色缓冲液

使用Cy3滤波片组在显微镜下观察 

储备溶液配制

GGR169-神经酰胺原液（100X）
向GGR-神经酰胺（组分A）中加入100 µL DMSO（组分C）制成GGR169-神经酰胺原液（100X）。
注意：将未使用的GGR-神经酰胺原液分装在-20°C下，以单次使用，避免冻融循环。
 
工作溶液配制
GGR169-神经酰胺工作液
将10 µL GGR169-神经酰胺原液（100X）添加到990 µL染色缓冲液（组分B）中，制成GGR169-神经酰胺工作液。
可选：向1 mL GGR169-神经酰胺工作溶液中加入10 µL Hoechst 33342（组分D）以进行核染色。在带有DAPI滤光片组的荧光显微镜下观察。

操作步骤

以下指南应用于指导方针，并可根据要求进行修改。

1. 接种并根据需要处理细胞。

2. 将100 µL GGR169-神经酰胺工作溶液直接添加到细胞培养基中。

3. 在室温或37°C下孵育15至30分钟。

4. 除去GGR169-神经酰胺工作溶液，并用DPBS或您选择的缓冲液清洗一次。

5. 加入100 µL /孔的染色缓冲液（组分B）。

6. 在装有Cy3滤光片的荧光显微镜下观察。 

图示

图1.HeLa细胞中GGR169神经酰胺高尔基染色的荧光图像。在37°C下，用100μL具有Hoechst 33342的GGR169-神经酰胺工作溶液对细胞染色20分钟。