Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

产品简介

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测中的 Nuclear Red CCS1 是一种膜不渗透性、蓝色激光激发的 DNA 染料。在固定细胞中，染料可通过透化的细胞膜与细胞 DNA 结合，其信号强度与 DNA 含量成正比。由于该染料也会与 RNA 结合，因此需要使用试剂盒中提供的 RNase A 处理细胞，以降解 RNA，从而准确分析 DNA 含量。红色荧光信号可与其他荧光标记物联合使用，提供多参数的细胞周期分析，帮助研究人员更全面地了解细胞增殖和周期调控。

产品优势

保持细胞天然状态：避免了固定剂可能引起的细胞皱缩、聚集或DNA片段化。

简化流程：省去了固定、离心洗涤等步骤，大大缩短了实验时间。

减少细胞损失：离心步骤越少，因操作造成的细胞丢失就越少，对于珍贵样本尤为重要

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞至预期时间（诱导凋亡或调控细胞周期）

2.对于每个样品，用0.5 mL PBS制备细胞，密度为5×105至1×106细胞/ mL。

贴壁细胞：将细胞用胰蛋白酶消化后悬浮于含10% FBS培养基，1000 rpm离心5分钟），PBS重悬细胞

悬浮细胞：将细胞1000 rpm离心5分钟，PBS重悬细胞。

注意：不同细胞系需单独评估最合适处理密度

3.用70％乙醇固定细胞：

将0.5 mL细胞悬液加入1.2 mL无水乙醇（终浓度约70%）

在冰上孵育细胞至少2小时（或在-20°C过夜）。在操作之前，细胞可以在-20°C下保存2年。

注意：乙醇固定适用于细胞表面抗原检测；全细胞分析需加入RNase消除双链RNA干扰；

4.用Nuclear Red CCS1染色细胞：

4.1 1000 rpm离心细胞5分钟，用冷PBS至少洗涤一次。

4.2 用0.5 mL Assay buffer（组分C）重悬细胞

4.3 5 µL 100X Nuclear Red CCS1（组分A）和5 µL 100X RNase A（组分B）。

4.4.室温避光孵育细胞30至60分钟。

注意：孵育时间需根据细胞类型和浓度优化

4.5.可选：1000 rpm离心5分钟后用Assay buffer重悬

4.6.使用FL2通道（Ex / Em = 490/620 nm），通过流式细胞仪检测荧光强度。 

百萤生物为AAT Bioquest授权的中国区域代理商

注：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床及其他非科研用途！