Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 405nm激发
产品介绍
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的专业工具。细胞活力可通过多种参数进行评估,本试剂盒通过检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻现象特异性监测细胞凋亡过程。在凋亡发生时,PS会从细胞膜内侧转移至外侧,其细胞表面暴露可作为凋亡早期/中期的普适性标志物,且该检测信号早于细胞形态学变化出现。
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒采用专利小分子Apopxin™ PS探针,该绿色荧光染料可被405 nm紫激光有效激发,并在~520 nm处发射强绿色荧光。本产品经过专门优化,适用于配备紫激光(Violet Laser)的流式细胞仪,特别适合用于细胞多色流式分析。
由于其大斯托克斯位移(Stokes Shift)及显著提升的PS亲和力,本试剂盒相比仅适用于流式平台的常规膜联蛋白V凋亡检测产品具有更强稳定性,也可用于荧光酶标仪检测平台。
样品实验方案
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本(200 µL/样本)
2.加入Apopxin Violet 500检测溶液
3.室温避光孵育30-60分钟
4.使用配备520/40 nm滤光片(AmCyan通道)的流式细胞仪分析细胞。
重要提示:实验前需将100X碘化丙啶(组分C)于室温解冻。
实验操作流程
1.使用测试化合物处理细胞(如:Jurkat细胞用喜树碱处理4-6小时)以诱导细胞凋亡。
注意:贴壁细胞因收获过程可能损伤膜结构,常规不建议流式检测。但Casiola-Rosen和van Engelend等已建立相关方法
2.离心收集细胞,得到1-5×105个细胞/管。
3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。
4.将2μLApopxin Violet 450(组分A)加入细胞中。
(可选步骤)加入2 µL 100X碘化丙啶(组分C)标记坏死细胞。
5.室温避光孵育30至60分钟。
可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300μL的测定缓冲液(组分B)以增加体积。
6.使用配备520/40 nm滤光片(AmCyan通道)的流式细胞仪的流式细胞仪分析细胞。
流式细胞仪分析方案
凋亡检测
使用配备520/40 nm滤光片(AmCyan通道)的流式细胞仪定量Apopxin™ Violet 500结合情况
细胞活力检测
添加碘化丙啶后通过610/20 nm滤光片(PE-Texas Red通道)分析
注:贴壁细胞因收获过程可能损伤膜结构,常规不建议流式检测。但Casiola-Rosen等学者已建立相关方法
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床及其他非科研用途!
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