Cell Navigator 荧光法脂滴检测分析试剂盒 绿色荧光

简要概述

        Cell Navigator 荧光法脂滴检测分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于脂滴检测的试剂盒，脂质液滴，也称为脂质体，油体或脂肪体，是富含脂质的细胞器，可调节中性脂质的储存和水解。它们还充当许多重要生物过程（如脂肪酸和细胞胆固醇）的脂质来源的贮藏库，以促进能量，膜的形成和维持。细胞质脂质滴的异常积累发生在多种病理状况中，并且可以指示代谢缺陷或发病机理。 AAT Bioquest的Cell Navigator 荧光脂质滴测定试剂盒是一种简单的测定方法，可以定量测量脂质滴的积累。试剂盒中使用Nile Green 进行亲脂性染色。 Nile Green 在富含脂质的环境中发出强烈的荧光，而在水性介质中的荧光却很少。它是使用荧光 ，流式细胞仪或荧光酶标仪检测细胞内脂质滴的重要染色剂。与具有广泛荧光光谱的尼罗河红不同，尼罗河绿 仅用绿色荧光染色细胞内脂质小滴。它可以与其他荧光染料一起用于多色染色。使用FITC滤光片组可以观察到绿色荧光信号。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Navigator 荧光法脂滴检测分析试剂盒。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

用测试化合物准备细胞
添加Nile Green 工作溶液
在室温或37°C下孵育10至30分钟
读取荧光强度

溶液配制

1.工作溶液配制

通过将5 µL 200X Nile Green （组分A）稀释到1 mL染色缓冲液（组分B）中来制备Nile Green 工作溶液。 注意：50 µL的Nile Green （组分A）足以容纳一个96孔板。 避光。 Nile Green 的浓度取决于具体应用。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

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样品示例及操作

1.对于贴壁细胞：

1.1在96孔黑色壁/透明底板（100 µL /孔/ 96孔）中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上生长细胞。

1.2轻轻吸出培养基，并加入等体积（例如100 µL /孔/ 96孔板）的Nile Green 染色溶液。

1.3将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育10-30分钟。

1.4去掉Nile Green 工作溶液（可选）。

1.5用酶标仪读取485/520 nm处的荧光，或使用带有FITC滤光片组的荧光 观察细胞。
 
2.对于悬浮细胞：

2.1将细胞以1000 rpm的速度离心5分钟，以得到每管1-5×105个细胞。

2.2在500 µL Nile Green 工作溶液中重悬细胞。

2.3在避光条件下，于室温或37°C孵育10至30分钟。

2.4离心除去Nile Green 工作溶液，然后将细胞重悬于500 µL预热的培养基或您选择的缓冲液中，以使每管1-5×10⁵个细胞（可选）。

2.5使用带有FITC滤光片组或流式细胞仪在FL1通道的荧光 监控荧光的增加。

图1.使用Cell Navigator 脂质液滴荧光测定试剂盒的对照（左）和油酸处理的HeLa细胞（右）中细胞内脂质液滴的荧光图像。 将HeLa细胞与300 uM油酸孵育24小时，以诱导细胞内脂质液滴的形成。 用PBS洗涤后，将细胞用1X Nile Green 和Hoechst 33342（Cat＃17533）标记。