活细胞荧光示踪探针CFSE

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简要概述

        活细胞荧光示踪探针CFSE是美国AAT Bioquest生产的荧光示踪探针，众所周知，细胞的荧光标记是确定总细胞数或样品中存在多少活细胞的有效方法。流式细胞仪结合荧光染色是分析异质细胞群的有力工具。荧光素二乙酸酯（FDA）及其衍生物是非荧光分子，其扩散到细胞中并被细胞内非特异性酯酶水解以产生荧光产物。荧光产物只能在具有完整细胞膜的细胞中积累; 因此，具有渗漏膜的死细胞不会被染色。FDA及其类似物（如CDCFDA）的膜转运和细胞内水解的精确动力学与细胞功能有关，因此FDA标记可用于通过流式细胞术或荧光 监测细胞。FDA染料标记细胞的荧光强度在细胞系和菌株之间差异很大，可能是由于细胞内酯酶活性的差异。CFSE是胺反应性FDA衍生物，广泛用于通过流式细胞仪监测细胞增殖。AAT Bioquest为流式细胞仪提供了这种方便的包装尺寸。可以用90uL无水DMSO将每瓶CFSE重构成10mM的储备浓度。应保护DMSO储备溶液避光，并在-20°C下与干燥剂一起储存，避免冻融。CFSE是胺反应性FDA衍生物，广泛用于通过流式细胞仪监测细胞增殖。AAT Bioquest为流式细胞仪提供了这种方便的包装尺寸。可以用90uL无水DMSO将每瓶CFSE重构成10mM的储备浓度。应保护DMSO储备溶液避光，并在-20°C下与干燥剂一起储存，避免冻融。CFSE是胺反应性FDA衍生物，广泛用于通过流式细胞仪监测细胞增殖。AAT Bioquest为流式细胞仪提供了这种方便的包装尺寸。可以用90uL无水DMSO将每瓶CFSE重构成10mM的储备浓度。应保护DMSO储备溶液避光，并在-20°C下与干燥剂一起储存，避免冻融。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的活细胞荧光示踪探针CFSE。 

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产品说明书

操作步骤

1.准备10 mMDMSO储备溶液

对于＃22022：将5.6mg溶于1ml DMSO中以制备10mM储备溶液（1mg / ml相当于1.8mM）; 对于＃22028，向每个小瓶中加入90μLDMSO以制备10mM储备溶液。

注意：应及时使用 ; 任何剩余的溶液应等分并在< -20 ^o C冷冻。避免反复冻融循环，避免光照。

2.准备CFSE工作解决方案

在使用前准备CFSE 工作溶液（0.5至5μM），用Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液稀释来自步骤1 的DMSO储备液（2 000至2,000次），pH值7.通过涡旋混合均匀。

3.用流式细胞仪或荧光 分析细胞：

3.1用测试化合物处理细胞一段所需的时间。

3.2离心细胞，每管取1-5×10 ⁵个细胞。

3.3将细胞重悬于500μL 染料工作溶液中（来自步骤2）。

3.4在室温或37 ° C 下用染料溶液孵育细胞10到30分钟，避光。

3.5从细胞中取出染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。将细胞重悬于500μL预热的HHBS或培养基中，每管获得1-5×10 ^5个细胞。

3.6使用流式细胞仪（FL1通道） 或荧光 监测Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光变化。