Y1HGold化学转化感受态细胞瑞楚生物REBIO

货号	产品规格	销售价	折扣价	库存	数量	操作
R09808-20T	20×100μl	¥850.00	¥NaN	1000	-+
R09808-50T	50×100μl	¥1500.00	¥NaN	1000	-+
R09808-100T	100×100μl	¥2500.00	¥NaN	1000	-+

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基因型：MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1 
用途： 酵母单杂系统用菌株，MATα型，可直接转化质粒进行筛库实验。
pGADT7质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。-80℃可保存三个月。
操作方法：
1. 取pBait-AbAi质粒5µg，BstBI或 BbsI酶切1小时，回收。
2. 取100 μl冰上融化的Y1HGold感受态细胞，依次加入预冷的线性pBait-AbAi质粒1-5 µg（体积不高于15 µl），Carrier DNA (95-100度5 min,快速冰浴，重复一次) 10 µl，PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀，30度水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
3. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
4. 5000 rpm离心 40 s弃上清，ddH2O 400 µl 重悬，离心 30s弃上清。
4. ddH2O 50 µl重悬，涂SD/-Ura平板，29℃培养72 h。
5. 挑取5-10个 ，用PCR方法确定pBait-AbAi 整合到Y1HGold 基因组中，PCR 阳性菌株在SD/-Ura平板划线，29℃培养72 h，4℃保存，此菌株即是Y3HGold[Bait/AbAi] 菌株。