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卡迈舒(上海)生物科技有限公司

15800458638

猪伪狂犬(PRV)抗体(IgG)ELISA试剂盒

分析试剂产品卡迈舒/Kmaels猪伪狂犬(PRV),欢迎选购!

¥1260
¥1200
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1
≥2
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99
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级别 :
超纯、高纯
用途类别 :
检测试剂
含量 :
99%
品牌 :
卡迈舒/Kmaels
用途范围 :
仅用于科研实验用
产品规格 :
48T/96T
特色服务 :
准确性好,灵敏度高,有质量问题包退换
产品详情
Product details

猪伪狂犬(PRV)抗体(IgG)ELISA试剂盒中内容(96)

1. 重组冻干标准品,10ng/管,总2管。

2. 预包被抗96孔板。

3. 样品稀释液,30ml。  

4. 生物素标记120μl,效价1100

5. 抗体稀释液,12ml。  

6. 亲和素-过氧化物酶复合物(ABC),120μl,效价1100

7ABC稀释液,12ml

8TMB显色液,10ml

9TMB终止液,10ml

猪伪狂犬(PRV)抗体(IgG)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材

1. 标准规格酶标仪。

2. 自动洗板机。  

3. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时, 用多通道移液器。

4. 干净的试管和Eppendof管。  

5. 使用中性PBSTBS作为洗涤液。0.01M TBS配法为:1000ml H2O中加Tris 1.2g, NaCl 8.5g;  纯乙酸450μl或浓盐suan700μl左右调节pH(7.2-7.6)0.01 M PBSpH7.2-7.6)配法:1000ml蒸馏水中加氯化钠8.5g, Na2HPO4·12H2O 3.5g, NaH2PO4·2H2O  0.25g

洗板方法  

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的PBSTBS洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。  

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

操作程序  

所有试剂用前需在室温平衡。试剂或样品稀释时,切不可忘记混匀。每次检测都应该做标准曲线。如果估计样品VEGF浓度>2000pg/ml时,应在试管中将样品用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。  

1. 确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目,并增加1孔作为TMB空白显色孔。总数=样品数+9;做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。  

2. 将1000pg/ml 500pg/ml250pg/ml125pg/ml62.5pg/ml31.3pg/ml15.6pg/ml的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为零孔。对于人血清、体液、组织匀浆或细胞培养上清,每孔先加50μι样品稀释液,再加50μι样品。

3. 酶标板加上盖,37℃反应120分钟。

4. 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体(将自动洗板机的洗涤次数设为零再开始即可);或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。不洗。

5. 将准备好的生物素抗人VEGF抗体工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白显色孔除外)。37℃反应60分钟。  

60.01M TBS0.01M PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。吸去或甩去多余液体。

7. 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白显色孔除外)。37℃反应30分钟。

80.01M TBS0.01M PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。吸去或甩去多余液体。

9. 按每孔0.1ml依次加入TMB显色液,37℃避光反应20-25分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显)。  

10. 按每孔0.1ml依次加入TMB终止液,此时蓝色立转黄色。  

11. 用酶标仪在450nm测定O.D.值,将TMB空白显色孔设为对照。  

12. 所有的标准品和样品的吸光值减去零孔的吸光值后,在坐标纸上画出曲线,以吸光值作为纵坐标,以浓度作为横坐标。  

13. 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算( )。应记住由于样品稀释了1倍,其实际浓度应该×2

猪伪狂犬(PRV)抗体(IgG)ELISA试剂盒操作程序总结  

1. 加样品和标准品,37℃反应120分钟。不洗。  

2. 加生物素标记抗体,37℃反应60分钟。0.01M TBS洗涤3次。

3. 加ABC37℃反应30分钟。0.01M TBS洗涤5次。

4TMB37℃反应20-25分钟。

5. 加入TMB终止液,读数。

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