大鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒使用目的：

     为定量（性）测定活化的目标浓度的血清，血浆，组织匀浆，细胞培养上清及其他生物液体,仅用于科研,不得用于医学诊断。

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被目标物抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标物呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

大鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒组成

名称 96孔配置 48孔配置 备注 

微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 

标准品 0.5mL*6管 0.5mL*6管 按说明书复溶 

样本稀释液 10mL 10mL 无 

检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 

20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书稀释 

底物A 6mL 3mL 无 

底物B 6mL 3mL 无 

终止液 6mL 3mL 无 

封板膜 2张 2张 无 

说明书 1份 1份 无 

自封袋 1个 1个 无 

大鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒样本处理及要求

1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于2000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8℃ 2000g离心30分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：2000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

大鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

1. 标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。

2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。