大鼠低氧诱导因子1αELISA试剂盒 HIF-1α试剂盒 HIF-1α ELISA操作步骤：

1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照说明书在小试管中进行稀释。

2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4.  配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.  加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.  温育：操作同3。8.  洗涤：操作同5。9.  显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光（OD值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

大鼠低氧诱导因子1αELISA试剂盒 HIF-1α试剂盒 HIF-1α ELISA注：本试剂只用于科研，不能临床。

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