Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合流式细胞检测

产品介绍

尽管JC-1被众多实验室广泛使用，但其极差的水溶性带来了极大不便。即使在1 µM的低浓度下，JC-1在水性缓冲液中仍易发生沉淀。为满足高染料浓度需求而开发的JC-10，成为JC-1的更优替代品。相较于JC-1，JC-10具有显著改善的水溶性。该染料能选择性进入线粒体，并随着膜电位升高发生可逆的颜色变化——从绿色转变为橙色。这一特性源于膜极化时JC-10可逆性聚集体的形成，导致发射光波长从520 nm（单体形式）红移至570 nm（积聚集体）。当以490 nm激发时，随着线粒体膜极化程度增加，JC-10的颜色会从绿色可逆地变为绿橙色。两种颜色均可通过流式细胞仪标配滤光片检测：绿色荧光在FL1通道分析，绿橙色荧光则在FL2通道分析。

除流式细胞术外，该染料还可用于荧光成像与荧光微孔板检测平台。本试剂盒提供所有关键组分及优化后的实验方案，专为检测线粒体膜电位丢失的细胞凋亡而设计。其荧光检测原理基于阳离子脂溶性JC-10染料对线粒体膜电位变化的响应：在正常细胞中，JC-10富集于线粒体基质并形成红色荧光聚集体；而在凋亡或坏死细胞中，JC-10以单体形式存在并呈现绿色荧光。

本试剂盒针对流式细胞术筛选凋亡激活剂/抑制剂进行了优化。同时我们还提供适用于高通量筛选的96孔和384孔荧光微孔板规格试剂盒（货号22800）

适用仪器

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

数据分析

1.在活的非凋亡细胞中，JC-10作为细胞溶质染色绿色中的单体存在，并且还在线粒体染成红色的聚集体中积累。 在凋亡细胞和死细胞中，JC-10仅以单体形式存在，染色细胞溶质绿。
2.使用FL2通道可检测到健康细胞中含有红色JC-10聚集体的线粒体。 通过使用FL1通道（FITC）可检测凋亡细胞中的绿色JC-10单体。
3. FL1与FL2的强度比用于监测化合物处理诱导的线粒体膜电位变化。

图1. FCCP诱导的JurKat细胞线粒体膜电位变化的影响。 将JurKat细胞染色载有JC-10染料加载溶液以及DMSO（Top）或5μMFCCP（低）10分钟。 使用FL1和FL2通道，用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式细胞仪测量J-聚集体和单体形式JC-10的荧光强度。 将未补偿的数据（左栏）与补偿数据（右栏）进行比较。