呕吐毒素免疫亲和柱 货号：FD-C31

　　简介

　　呕吐毒素免疫亲和柱适合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析试剂盒结合使用，定量检测DON。适用于谷物、饲料等样本中的DON净化处理，提高了样品的纯度，纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。储存条件 2-8℃冷藏保存，不可冷冻。

　　1 呕吐毒素免疫亲和柱用途

　　适用于谷物、饲料等样本中的DON净化处理，提高了样品的纯度，纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。

　　2 呕吐毒素免疫亲和柱概要

　　呕吐毒素主体成分为DON(脱氧雪腐镰刀菌烯醇)，属于单端孢霉烯族化合物，呕吐毒素是食品中常见的真菌毒素，在自然界中广泛存在，由于它们具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质，因此，对人类及动物的健康构成了威胁，特别是对免疫功能具有明显的影响对人类的健康构也造成很大威胁，呕吐毒素被列为3类致癌物，世界各国对食品，饲料中的呕吐毒素都有严格的限量标准。

　　3 呕吐毒素免疫亲和柱原理

　　测定的基础是抗原抗体反应，抗呕吐毒素(DON)的单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上，样品中的DON经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢通过DON免疫亲和柱，在免疫亲和柱内，DON与抗体结合，洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。最后采用甲醇洗脱DON，然后进行相关分析。

　　4 呕吐毒素免疫亲和柱试剂配制

　　0.1%吐温20-PBS溶液：将0.1%吐温20-PBS粉末(厂家提供)直接用900mL水全部溶解后，用HCl或NaOH调pH至7.4，最后用水定容至1L。

　　5M NaOH溶液：称取20g NaOH，溶于100mL水中。

　　5 呕吐毒素免疫亲和柱样品制备

　　----准确称取25g(精确至0.01g)粉碎的样品，加入5g聚乙二醇8000，并与125mL水混合，摇床振荡提取15min;

　　----用快速定性滤纸过滤或4000r/min，离心5min;对于pH低于6.0的玉米加工副产物及饲料等的滤液或上清液，需要用5M NaOH调pH至7.0左右，并用玻璃微纤维滤纸过滤，至滤液澄清，备用;

　　----准确移取2.5mL混匀滤液(相当于0.5g样品)过亲和柱。

　　6 呕吐毒素免疫亲和柱净化

　　注意：整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!

　　----3mL柱管取出上方堵头，减去上堵头螺纹下突出部分，插回柱子上，另一端与20mL针筒固定后使用;将1mL柱管上方堵头取出后斜剪断，然后再插回柱子上(柱管内偶见有小气泡属正常现象，不影响亲和柱的使用);

　　----准确移取上述混匀滤液，注入针筒中，调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过免疫亲和柱;

　　----用20mL 水冲洗柱子(对于饲料及玉米加工副产品等颜色较深的样液，先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗，再用10 mL 10%甲醇-水冲洗柱子，最后用10mL水冲洗柱子。)，流速1秒/滴，弃去流出液，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余液体;

　　----准确加入1.5mL甲醇(色谱级)洗脱，流速自然重力，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余液体。收集全部洗脱液，进行相关测定。

　　7 呕吐毒素免疫亲和柱保质期

　　有效期为12个月。

　　生产日期见包装盒。