Amplite 比色法钙离子定量试剂盒*蓝色*

简要概述

        Amplite 比色法钙离子定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于钙离子定量的试剂盒，钙对所有生物体都是必不可少的，特别是在细胞生理学中，钙离子Ca²⁺进出细胞质的运动是许多细胞过程的信号。钙是人体中质量第五丰富的元素，它是一种具有许多功能的常见细胞离子信使，也可作为骨骼中的结构元素。钙在调节血管收缩和舒张，神经冲动传递，肌肉收缩和激素分泌中起重要作用。钙的血清水平在人体内的相当有限的范围（9至10.5mg / dL）内受到严密调节。低钙血症和高钙血症都是严重的医学疾病。 Amplite 钙检测试剂盒提供了一种在生理解决方案中检测钙的简单方法。该试剂盒使用我们的Calcium Blue 作为显色钙指示剂。其吸光度随钙结合而变化。 Calcium Blue 在中性pH范围内紧密结合钙，产生钙蓝色 - 钙复合物，在~650 nm处具有强烈的吸收。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供Amplite 比色法钙离子定量试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备测试样品和钙标准溶液（50μL）
添加Calcium Blue 试剂（50μL）
在室温下孵育5-10分钟
监测600或650 nm处的吸光度强度

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
钙标准溶液（3 mM）：
将10μL标准钙（300mM）（组分C）加入到990μL稀释缓冲液（组分B）中以得到钙标准溶液（3mM）并充分混合。

2.钙标准溶液配制

操作步骤

表1.透明底96孔微孔板中钙标准品和测试样品的布局。

CS =钙标准（CS1-CS7）; BL =空白对照; TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

钙测定

将连续稀释的钙标准品从150μM加至2.34μM加入CS1至CS7的孔中，一式两份。

向钙标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLCaliumBlue （组分A），使总钙测定体积达到100μL/孔。 注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

在室温下孵育反应5至10分钟，避光。

用OD 600 nm或650 nm的吸光度板读数器监测吸光度强度。

血清或尿液样本的分析方案

表3.每个孔的试剂组成

钙测定

1.将1.5μM至0μM的连续稀释的钙标准品一式两份加入CS1至CS7的孔中。

2.向钙标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入200μL钙蓝™（组分A），使总钙测定体积达到210μL/孔。 注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.在室温下孵育反应5至10分钟，避光。

4.用OD 600 nm或650 nm的吸光度板读数器监测吸光度强度。

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（吸光度）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算钙样品。