霉菌培养箱污染的原因及解决方法！快讯

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导读：

霉菌培养箱污染了怎么处理

霉菌培养箱是专门用于培养放线菌大肠杆菌以及各种霉菌，它为这些菌类提供恒温恒湿的生长环境。但在培养的过程中箱体难免会产生霉菌污染，为避免被微生物污染，细胞培养箱的的清洁与消毒是必不可少的。是大专院校、医药、电子、化工、生物科研部门作储藏菌种、生物培养、是科研实验室必需测试设备。用于测试和判断其在湿热温度环境变化后的参数及性能。

一、培养箱微生物污染的原因：

1，取放细胞时引起的污染

细胞培养过程中，取放细胞是基本的操作，培养房开关门的瞬间，环境中的微生物或多或少会进入培养箱中，而且内外温差导致内门冷凝水的产生，极易吸附微生物，都是造成培养箱污染的风险因素。

2，灭菌不彻底造成的二次污染

细胞培养过程中，因其它操作问题（如培养基泼洒，水盘污染等），造成培养房的大规模污染也时常会发生，此时就需要对培养箱进行灭菌消毒，常规的消毒（如紫外照射）只能达到表面消毒的效果，特别是对真菌等顽固性污染，无法进行彻底灭菌，导致后续培养过程中细胞污染频发。

二、细胞培养箱的污染源 ??

凡是混入细胞培养箱(细胞培养环境)中，对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染。细胞持续在污染环境中生长时，轻者细胞生长缓慢，细胞分化变形，较重的细胞增殖停止，从瓶壁脱落，甚至死亡。不同的污染物对细胞的影响也有差别，有的影响是长期、缓慢和潜在的，而有的则能在很短的时间内抑制细胞生长或产生有毒物质杀害细胞。根据污染源不同主要可以分为：生物性污染、化学性污染、物理性污染和气溶胶污染。???

1、生物性污染：

这是常见也是危害大的污染。如细菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原体、非同种细胞等。这些污染源有可能是人为带入，或是细胞在放入培养箱前已经受污染，再或者是箱体本身没有消毒干净。体外培养的细胞自身没有抵抗污染的能力，而培养基中所加的抗微生物污染的能力也是有限的，因而细胞微生物污染一旦发生往往是无法挽救的。

1）支原体：支原体污染后，因为它们不会使细胞死亡可以与细胞长期共存，培养基一般不发生浑浊，细胞无明显变化，外观上给人以正常感觉，实则细胞已经受到多方面潜在影响，如引起细胞变形，影响DNA合成，抑制细胞生长等，往往被大多数实验者忽视。

2）细菌：细菌污染后，培养基1-2天就会变色，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显，应迅速将污染细胞与其它细胞系隔离，灭菌后丢弃，还要用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台。

3）病毒：由于病毒寄生生存，爆发后尽快和正常细胞隔离，丢弃处理，相对来说容易处理，对操作者威胁较大；尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。

4)真菌(霉菌和酵母菌)：真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了；目前传统的灭菌方式很难将其杀灭，包括现在常用的两性霉素，一旦污染容易反复爆发，尤其孢子很难杀灭。

5)非同种细胞：即细胞交叉污染，由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开，往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前，世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染，致使许多实验宣告无效。

2、化学性污染：

培养箱中许多化学物质都可以引起细胞污染。如细胞培养容器清洗过程中残留的洗涤剂、加湿器中未纯化的水、人为带入的液体或气体都可能成为化学性污染的来源。不同化学物质对细胞污染是不一样的，有的可能促进或抑制细胞生长，有的甚至杀死细胞。

3、物理性污染：

培养环境中的物理因素，如温度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光)会对细胞产生影响。物理性污染常常被人们所忽视或被笼统地归为化学性污染，其主要是在代谢水平或分子水平上，影响细胞正常的生理过程。? ??

4、气溶胶污染：

气溶胶是液体或固体微粒均匀地悬浮在气体介质中的分散体系，当微粒是微生物时，就是微生物气溶胶，如果这种微生物是病原性的，就是病原微生物气溶胶。细菌、病毒等病原体通过气溶胶可在人与人、人与环境之间传播。微生物气溶胶可分为两大类：一类是飞沫核气溶胶，另一类是粉尘气溶胶。医学实验室内许多操作都可以产生气溶胶，并且大多可能是病原微生物形成的感染性气溶胶，由于其气溶胶分子小，漂浮在空气中、粘附于人身上，易在空气中扩散而污染实验室的空气。

三、如何防控细胞培养箱的污染

无论新人还是熟手，细胞污染都是必须要面对的，那对于细胞污染，措施就是预防为主，因为细胞一旦污染，想救是非常困难的，即便救活，细胞状态也会差很多。对于细胞培养箱的微生物控制，消毒和灭菌是整个环节的重中之重。

消毒是指杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其孢子。灭菌是指杀死所有微生物，当培养箱内细胞受到污染时则需要采取灭菌措施。一般在培养箱内细胞没有污染的情况下平均1-3个月彻底消毒一次。同时对于细胞室内空气也应及时采取消毒措施，因为上述的所说的气溶胶污染就是通过空间环境传播的。可以联合使用液体和气体消毒剂来清除实验室空间、用具和设备的污染。这样才能大程度的必免微生物的污染。

为了确定目前一些常用消毒方式（液体消毒剂、紫外和加热）对细胞培养箱各种微生物（包括芽孢）杀灭能力,选出既经济、有效且腐蚀性小,安全的常用消毒剂, 作者通过对微生物及其芽孢灭活具有潜在应用价值的资料进行调查,总结出消毒剂应具备的特性：

1、需要具有广谱的杀菌效果，一种消毒产品就能杀灭细菌、真菌、霉菌等病原微生物，并且完全生物可分解，对人无害，无腐蚀性，无残留。

2、不产生细菌耐药性，以符合长期重复使用的要求；

3、要求是食品级消毒剂，达到无害的等级；

4、要求在行业中有成熟的应用；

那么当培养箱出现霉菌污染我们应该怎样进行处理呢？首先我们可以看看培养箱自身带不带有灭菌功能，如果没有我们可以先用纯水擦洗，再用奥克泰士杀孢子剂擦拭，晾干即可完成杀菌作用。奥克泰士杀菌消毒剂可彻底解决细胞培养箱微生物的污染问题。

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四、霉菌培养箱具体清洁方式

1、霉菌培养箱要保持清洁，可用软布蘸过氧化氢银离子溶液（奥克泰士）擦洗箱体表面污迹、污垢，自然晾干即可。

2、如果霉菌培养箱后面的冷凝器上有尘土，会影响散热，停电后使用皮老虎鼓吹去。

3、每次使用完毕，立即清洁仪器，然后悬挂相应标识，并及时填写使用记录。

4、设备内外表面应该光亮整洁，没有污迹。

五、使用霉菌培养箱注意事项：

1.由被检验标本或培养物中取材观察霉菌形态时，必须使用接种环。接种环系采用一段长约5 ～8cm 硬度适中的镍质电阻丝或特制铂丝，安置在一金属或玻璃棒上制成。无环者则称接种针。

2.接种环或接种针每次使用前后，均须用霉菌培养箱。即在霉菌培养箱内彻底烧灼1次，在腔内金属棒或玻璃棒部分亦须转动着用进灭菌。

3.接种环(针)经霉菌培养箱使用后，需待冷却后再沾取标本或放置于工作台上，以防烫死微生物和烧损桌面。(冷却时间跟传统酒精灯时间一样)。

4.也可对玻璃材料的微生物培养管进行消毒，此时特别注意管中不能有任何液体和其它物体，以免里面的液体溅出或发生爆炸等危险事故。

5.不染色标本和染色标本观察后，应立即投入消毒液内灭菌。

6.使用过玻片，务须彻底消除玻片上的染色霉菌后再用，否则再次使用时可能做出错误诊断。

2.4 将温度整定好后，培养箱便能自动控制所需的温度。

3．维修、保养及注意事项

3.1 RD1或RD2熔断，指示灯坏，调换RD1或RD2指示灯 4.2控温仪坏，压缩机损坏，修理或调换控温仪和压缩机

3.3 压缩机无工作电压，连接线是否断头，修理或调换控温仪。

3.4 制冷回路有阻塞，应冲洗管道。

3.5 压缩机启动频繁，加宽控温范围，以3℃为宜，尽量不开门。

3.6 箱内温度过大、修理或调换风扇，尽量少开门。

3.7 培养箱放置不得有明显的倾斜，以拉开门然后轻轻一推，能自动收合为宜。

3.8 培养箱应放置在通风和无腐蚀性气体的场所。

奥克泰士德国进口，食品级过氧化氢、银离子复合型杀菌消毒剂，产品经过ISO9001/ISO14001管理体系认证，欧盟EMAS检测认证，IFS国际食品标准认证，德国莱茵TUV认证等。产品广谱杀菌，灭菌迅速，无二次残留，是世界公认的绿色广谱杀菌剂，能够快速杀灭包括芽孢、细菌孢子、真菌孢子、放射菌、分支杆菌、酵母菌、霉菌及霉菌毒素、病毒在内的所有类型的200多种微生物，达到商业无菌的要求。自引进中国市场以来，开始在实验室环境消毒，空间消毒，设备消毒及污水消毒等方面应用，数百家实验室取得了良好效果，解决了微生物难以控制的难题，取得了巨大的经济效益和社会效益，使奥克泰士应用技术得到推广普及。